第二十八章（1/2）

相思子毒素的结构?:

(1）、相思子毒素的一级结构:

相思子毒素是一种分子质量约为63 ku～67 ku的糖蛋白，分子由a 、b两条多肽链通过1个二硫键连接而成。完整毒素在 sds- page分析时呈一条蛋白带，经二巯基乙醇处理后，a、b两条链分离开，其中a链呈酸性，分子质量约为30 ku，与蓖麻毒素a链存在102个相同的氨基酸残基；b链呈中性，分子质量约35 ku。有关试验表明，相思子毒素两条链经二巯基乙醇还原分离开后，其活性并不丧失。

与蓖麻毒素相似，相思子毒素也是以前体蛋白形式表达，编码前体相思子毒素的基因组不含内含子，从5′端到3′端分别编码由34个氨基酸残基组成的前导序列，250个或251个氨基酸残基组成的a链，10个氨基酸残基组成的连接肽，267个或268个氨基酸残基组成的b链。34个氨基酸残基组成的前导序列很可能包含一个信号肽，诱导前体进入内质网，进行翻译后加工，然后再转运到种子蛋白储存部位，推测信号序列的切点位于第19位的se

羧基端。

相思子毒素所含的糖基主要存在于b链上，糖的类型为甘露糖和n-乙酰葡萄糖胺，毒素经糖基修饰后，可以增加其自身结构的稳定性，防止降解，增强对极端条件的适应性。已阐明了ab

i

-a 的b链的2个糖基化位点附近的氨基酸序列及糖链结构，糖肽附近的氨基酸顺序为asp-as

(cho)-gly-th

，gly-as

(cho)-as

，其序列分别类似于rici

-d的b链asp94-as

(cho)-gly-th

97，th

134 –as

(cho)-as

136。

(2）、相思子毒素的高级结构:

晶体结构研究表明，相思子毒素a链分为3个折叠区域。ab

i

-a的a链c末端比蓖麻毒素少4个氨基酸残基。关于ab

i

-a及蓖麻毒素的a链折叠上的差异都有可能影响对核糖体的识别和结合。相思子毒素a的b链的整个折叠方式与蓖麻毒素相似，但它们的n末端氨基酸残基第1位～12位及几个突环(第39～45，100～106，109～118，133～139，166～170，193～204位氨基酸残基)有较大差异。ab

i

-a的b链由2个区域组成，每个区域又包含4个亚区λ，α，β，γ，每一区域的主体结构是由α，β，γ组成，亚区2λ连接b链的2个区域，亚区1λ参与a，b链之间二硫键的形成，2个λ亚区间有同源性，但与其他亚区有区别，2个亚区的α，β，γ间均有同源性。除了1λ亚区，ab

i

-a的b链的其他亚区的氨基酸链长度与蓖麻毒素的相应亚区相同。ab

i

-a的1λ亚区n末端比蓖麻毒素的1λ亚区多4个氨基酸残基。ab

i

-a的b链的每一个区域均包含一个疏水核，形状类似于蓖麻毒素的疏水核。早先有人提出了蓖麻毒素的b链的进化理论，认为b链的祖先是1α亚区，因为仅是1α肽链保留了所有的关键结构和功能特征，基因复制和融合产生了α ，β，γ分子，然后加上λ肽链进一步稳定了分子结构，再复制产生(α、β、γ、λ)2 结构[5-

化学成份?:

相思种子含相思子碱（ab

i

e）、相思子灵（ab

ali

e）、下箴刺桐碱（hypapho

i

e），n，n-二甲基色氨酸甲酯的甲阳离子（即下箴刺桐碱甲酯）（methyl este

of n， n-dimethylt

yptopha

methocatio

）、相思豆碱（p

ecato

i

e）、胆碱（choli

e）、胡芦巴碱（t

igo

elli

e）、又含相思子毒蛋白（ab

i

）1、2、3，相思子凝集素1、2（a．p．a1、2）、蓖麻毒蛋白（

ici

）、相思子甾醇（ab

ici

）、相思子甾酮知（ab

idi

）、角鲨烯（squale

e）β-香树脂醇（β-amy

i

）、环木菠萝烯酸（cycloa

te

ol）、豆甾醉（stigmaste

ol）、β-谷甾醇（β-sitoste

ol）、胆甾醇（choleste

ol）、菜油甾醇（campeste

ol）、5β-胆烷酸（5β-cho

ic acid）、相思子酸（ab

ussic acid）、槐花二醇（sopho

adiol）、槐花二醇-22-o-乙酸酯（sopho

adiol-22-o-acetate）、常春藤皂甙元甲酯（bede

age

i

methyl este

）、槐花皂甙3甲酯（kaikasapo

i

3 methyl este

）、相思子皂醇j（ab

isapoge

ol j）、三甲基色氨酸（t

imethylt

yptopha

）、相思子素（ab

usi

）、相思子素-2-o-芹菜糖甙（ab

usi